Vai trò thiết yếu của Cyt-P450 trong những phản ứng oxygen hóa khác nhau đã được chứng minh.Bước nghiên cứu quan trọng tiếp theo là làm rõ cơ chế của quá trình cung cấp điện từ từ NADPH đến Cyt-P450, nơi mà sự hoạt hóa phân tử oxy xảy ra khi tiêu thụ đương lượng khử. Tuy nhiên, hệ thống oxygenase chứa Cyt-P450 của microsome gane gắn rất chặt vào màng và rất khó hòa tan. Hệ thống oxygenase chứa Cyt-P450 đầu tiên được làm rõ về các cấu từ tạo thành là hệ thống steroid 11Beta-hydroxylase của tuyến thượng thận do Omura và Cs. thực hiện.

      Trái với microsomal oxygenase, nơi mà tất cả các cấu từ của hệ thống đều liên kết chặt chẽ với màng, hệ thống steroid 11Beta-hydroxylase của ti thể tuyến thượng thận có thể được tách ra bởi sóng siêu âm thành những đoạn màng có chứa Cyt-P450 và một hệ thống NADPH-Cyt-P450 reductase hòa tan. Hệ thống reductase lại tiếp tục được phân đoạn bằng sắc ký thạnh một protein sulfur chứa sắt và một flavo protein có khả năng khử protein Fe-S bởi NADPH. Tất cả 3 cấu tử này là cần thiết cho sự tái tạo lại hoạt tính thủy phân. 

Hệ thống oxygenase hòa tan này chứa một Cyt-P450, một protein Fe-S có tên gọi "putidaredoxin" và một flavo protein, chất này khử putidaredoxin bằng NADH. Hệ thống Cyt-P450 vi khuẩn này rất giống về mặt cấu tạo với hệ thống thủy phân steroid có Cyt-P450 của ti thể tuyến thượng thận, mặc dù adrenodoxin có thể không thay thế được putidaredoxin trong hệ thống thủy phân camphor tái tạo.

       Đối với hệ thống oxygenase chứa microsomal Cyt-P450 cần phải có NADPH chứ không phải NADH cho phản ứng oxygenase, điều này gợi ý rằng có sự tham gia của một NADPH reductase đặc hiệu. Bằng cách gián tiếp, trong những năm 1960 người ta đã chứng minh sự tham gia của NADPH - cytochrom reductase trong việc cung cấp đương lượng khử từ NADPH đến teminal oxydase P450. Năm 1968, A.Y.H.Lu và M.J.Coon công bố đã tái tạo thành công hệ thống microsomal oxydase từ các yếu tố hòa tan. Một trong những cấu tử cần thiết là reductase. Thử nghiệm tái tạo này sau đó đã được lặp lại bằng những sản phẩm tinh sạch và đã củng cố cho quan niệm về 2 cấu từ protein gắn màng, Cyt-P450 và reductase, là cần thiết cho sự tái tạo hoạt động. Reductase này hiện nay được gọi là NADPH-cytochrom P450-reductase (CPR).

       Tuy nhiên, sự đóng góp của b5 vào việc cung cấp các điện tử cho microsomal Cyt-P450 đã sớm được phát hiện. Khi thêm NADH vào hỗn hợp phản ứng (sử dụng số lượng hạn chế NADPH) đã làm tăng một cách đáng kể sản phẩm của những phản ứng oxygenase. Sự tham gia của NADH Cyt-P450 có khả năng là qua Cyt b5. Sự tham gia của NADH Cyt-b5 reductase và Cyt-b5 sau đó đã được khẳng định bằng cách sử dụng nhiều kháng thể đối với các cấu tử microsomal này. Sự tái tạo lại hoạt tính oxygenase từ những cấu tử microsomal tinh chế đã cung cấp bằng chứng về sự kích hoạt oxygenase của b5. Đóng góp của b5 vào việc cung cấp điện tử cho Cyt-P450 là khác nhau đối với mỗi dạng Cyt-P450 khác nhau và còn phụ thuộc vào cơ chất của phản ứng. Một số dạng của Cyt-P450 được tính chế từ microsom gan cho thấy có sự đòi hỏi tuyệt đối với b5 cho một số cơ chất nhất định. Có 2 loại hệ thống oxygenase chứa Cyt-P450 khác nhau. Một loại được tìm thấy trong ti thể của tổ chức động vật và cả ở vi sinh vật, gồm 3 cấu tử protein là 1 flavo protein liên kết NADPH, 1 protein Fe-S và Cyt-P450. Loại kia thường được tìm thấy dưới dạng các hạt tiểu thể gắn bào màng lưới nội nguyên sinh và phổ biến rộng rãi trong các cơ thể eukaryotic khác nhau.