Các chất phân tích được chiết từ 250μL huyết tương người bằng acetonitril cho kết tủa protein. Sau khi bay hơi đến khô dung môi, các mẫu được hoàn nguyên với 250μL pha động và 100μL được tiêm vào HPLC. Phân tích sắc ký được thực hiện bằng cột Kinetex C18 và phát hiện bởi detector UV / Vis ở bước sóng 220nm và 298nm. Pha động là hỗn hợp dung dịch đệm phosphat 0,1M pH 3,15 và metanol theo chế độ gradient, ở tốc độ 1mL / phút.
Đối với tất cả các chất phân tích, giới hạn định lượng dưới là 1μg / mL và khoảng nồng độ tuyến tính trong khoảng từ 1 đến 100μg / mL, với các hệ số tương quan ≥0.999. Độ chính xác trong ngày là <4%, trong khi độ chính xác trung gian là <7% cho mỗi chất phân tích.
Khả năng ứng dụng của phương pháp đã được đánh giá bằng cách phân tích các mẫu huyết tương thu thập được từ 4 bệnh nhân bị bệnh nặng đang điều trị thay thế thận liên tục. Hơn nữa, việc phân tích vancomycin với VANC Flex® đã xác nhận mối tương quan tốt giữa kết quả của HPLC-UV và những bộ kit thương mại sẵn có thường được sử dụng bởi liệu pháp điều trị.
Phương pháp đã phát triển chỉ yêu cầu một thể tích huyết tương nhỏ và sử dụng cùng một giao thức chuẩn bị mẫu, pha tĩnh và điều kiện rửa giải cho tất cả các chất phân tích. Phương pháp này cung cấp các lợi thế cho việc chuẩn bị mẫu và dụng cụ và khá rẻ tiền, các tính năng giúp phương pháp này dễ dàng thực hiện cho phòng thí nghiệm nói chung.
» Tin mới nhất:
» Các tin khác: