Một phương pháp phân tích định lượng cho 5 ancaloit aporphine, nuciferine ( 1 ), nornuciferin ( 2 ), N -metylylimimobin ( 3 ), asimilobin ( 4 ), và pronuciferin ( 5 ), và 5 ancaloit benzylisoquinoline, armepavine ( 6 ), norarmepavine ( 7) ), N -methylcoclaurine ( 8 ), coclaurine ( 9 ), và norjuziphine (10 ), được xác định là thành phần chịu trách nhiệm cho hoạt động ức chế melanogenesis của chiết xuất hoa sen (nụ hoa của Nelumbo nucifera ), được phát triển bằng chất lỏng sắc ký khối phổ. Các điều kiện tối ưu để tách và phát hiện 10 alkaloit này đạt được trên cột π NAP, cột pha đảo với vật liệu đóng gói silica liên kết nhóm naphthylethyl, với axit axetic CH ₃ CN-0,2% là pha động và sử dụng khối lượng quang phổ được trang bị một nguồn ion hóa electrospray tích cực.Theo các giao thức được thiết lập, phân phối của các ancaloit 10 trong cánh hoa, receptacle, và các bộ phận nhị, được tách ra từ toàn bộ hoa, đã được kiểm tra.Theo dự kiến, mối tương quan tuyệt vời đã được quan sát giữa tổng hàm lượng alkaloid và hoạt tính ức chế melanogenesis. Trong số các alkaloit hoạt tính, nornuciferine ( 2 ) được tìm thấy để cung cấp cho một muối carbamate ( 2 ′ ′ ) thông qua sự hình thành của một axit carbamic không ổn định ( 2 ′ ) do hấp thụ carbon dioxide từ không khí.

1. Giới thiệu

Một cây Nymphaeaceae Nelumbo nucifera Gaertn. (tên thường gọi là "hoa sen" bằng tiếng Anh) được trồng rộng rãi ở các nước Đông Á . Tất cả các bộ phận của cây này, bao gồm lá, nhị hoa, hoa, hạt và thân rễ, đã được sử dụng làm thuốc hoặc rau truyền thống trong hàng ngàn năm . Hoa sen, nụ hoa của N. nucifera , được sử dụng để điều trị nôn mửa, chảy máu do chấn thương bên trong và bên ngoài, và nhiều bệnh về da khác nhau, cũng như thuốc an thần và chất chống viêm trong các loại thuốc truyền thống châu Á . Trong quá trình nghiên cứu của chúng tôi về thành phần hoạt tính sinh học từ nụ hoa N. nucifera , chúng tôi đã phân lập một số alkaloit, ví dụ, nuciferine ( 1 ), nornuciferine ( 2 ), N -methylasimilobine ( 3 ), asimilobine ( 4 ), pronuciferine ( 5 ), và armepavine ( 6 ), với các hoạt động ức chế melanogenesis trong theophylline-kích thích murine B16 melanoma 4A5 tế bào .Do sự quan tâm ngày càng tăng trong hoa sen như một mỹ phẩm có thể làm trắng da, có nhu cầu mạnh mẽ về các phép đo kiểm soát chất lượng hiệu quả để đảm bảo tính xác thực và nội dung của các thành phần hoạt động trong các sản phẩm đó và để xác minh các tuyên bố có nhãn. Trong bài báo này, chúng tôi đề xuất một phương pháp phân tích đơn giản, nhanh chóng và chính xác cho phép đo phổ khối sắc ký lỏng (LC-MS) đồng thời xác định định lượng 5 alkaloit aporphine ( 1 - 5 ) và 5 alkyloid benzylisoquinoline, ( 6 ), norarmepavine ( 7) ), N -methylcoclaurine ( 8 ), coclaurine ( 9) và norjuziphine ( 10 ), sử dụng quy trình chuẩn bị mẫu một bước.

2. Kết quả và thảo luận

2.2. Phân tích định lượng đồng thời 10 alkaloids ( 1 - 10 ) trong hoa sen

2.3. Ammonium Carbamate Salt ( 2 ′ ′ )

2.4. Ảnh hưởng của Hydrochloride của các ancaloit này ( 1 - 10 ) và 2a trên hoạt tính ức chế melanogenesis melanogenesis của Theophylline-Stimulated

2.5. Tác dụng trên nấm Tyrosinase

2.6. Ảnh hưởng đến sự biểu hiện của Tyrosinase, TRP-1 và TRP-2

2.7. Tương quan giữa hoạt tính ức chế melanogenesis và tổng hàm lượng alkaloit ( 1 - 10 )trong chiết xuất hoa sen

4.Kết luận

Chúng tôi đã phát triển một phương pháp thiết thực để xác định đồng thời định lượng 5 alkaloid aporphine, nuciferine ( 1 ), nornuciferin ( 2 ), N -methylasimilobine ( 3 ), asimilobine ( 4 ), và pronuciferine ( 5 ), và 5 alkyloid benzylisoquinoline, armepavine ( 6 ), norarmepavine ( 7 ), N -methylcoclaurine ( 8 ), coclaurine ( 9 ), và norjuziphine ( 10 ), trong hoa sen (nụ hoa N. nucifera ). Phương pháp đã được xác thực liên quan đến tuyến tính, giới hạn phát hiện, độ chính xác và độ chính xác. Xét nghiệm này có thể tái tạo và chính xác, và có thể dễ dàng sử dụng để đánh giá hoạt tính ức chế melanogenesis của theophylline trong các tế bào melanoma 4A5 B16 của chiết xuất hoa sen và các sản phẩm liên quan. Trong số các alkaloit hoạt tính, hợp chất 2 được tìm thấy để hấp thụ CO ₂ từ không khí để tạo ra một muối carbamate có thể đảo ngược ( 2 ′ ′ ) thông qua sự hình thành các axit cacbamic không ổn định ( 2 ′ ). Để làm rõ tính hiệu quả của việc phân tích định lượng 10 alkaloit ( 1 - 10 ) như một chất kiểm soát hoa sen, mối tương quan giữa tổng hàm lượng alkaloid và hoạt tính ức chế melanogenesis của các chất chiết xuất tương ứng đã được kiểm tra. Kết quả là, mối tương quan chính xác và chặt chẽ giữa phương pháp phân tích này và các hoạt động ức chế melanogenesis đã đạt được.